固相支持液萃取法分析沐浴露中的邻苯二甲酸酯

摘要：邻苯二甲酸酯在柔性乙烯制品和化妆品中通常作为添加剂使用。由于邻苯二甲酸酯的毒 性与其在人们日常生活中较高的暴露浓度，使得邻苯二甲酸酯分析的关注度日益增加。 本应用简报详细讨论了利用 Agilent Chem Elut 5 mL 无缓冲的固相支持液/液萃取 (SLE) 柱 对婴儿洗发水/沐浴露中的四种邻苯二甲酸酯（邻苯二甲酸二乙酯、邻苯二甲酸二丙酯、 邻苯二甲酸丁苄酯和邻苯二甲酸二环己酯）进行萃取和分析。使用配备二极管阵列检测 器的 Agilent 1200 Infinity 系列液相色谱仪对邻苯二甲酸酯进行分离和定量分析。采用报 道的 SLE 方法进行萃取能够使邻苯二甲酸酯的回收率达到 91% 至 108%。

前言 邻苯二甲酸酯是一类化合物，通常在柔性乙烯制品中用作添加剂 或在化妆品中作为溶剂或固定剂 [1,2]。它们主要作为增塑剂，用 来促进沐浴露和润肤露的吸收 [2,3]。邻苯二甲酸酯的使用会扰乱 人体内的激素平衡，引起生殖问题 [4]，已报道它们能够造成男性 精子数严重偏低 [5]。美国国家环境保护局 (EPA) 对邻苯二甲酸酯 的关注主要是由于此类物质有毒，且人们会在日常生活中通过各 种化妆品和塑料材料接触高含量的邻苯二甲酸酯。暴露于邻苯二 甲酸酯中可能引起儿童生殖系统的发育问题。2008 年的一项研究 表明，婴儿的邻苯二甲酸酯暴露非常普遍。研究显示，婴儿尿液 样品中检测到的高浓度邻苯二甲酸酯与（据报道）婴儿奶粉、婴 儿润肤露和婴儿洗发水的使用有关 [6]。 在以下实验中，我们通过固相支持液/液萃取 (SLE) 和液/液萃取 (LLE) 法从加标的洗发水/沐浴露样品中萃取邻苯二甲酸酯，然后 使用高效液相色谱 (HPLC) 对萃取所得邻苯二甲酸酯的百分比回收 率进行测定。再通过计算得到的回收率对两种方法（SLE 和 LLE） 进行比较。 在 SLE 中，使用高纯度、精确称量的惰性硅藻土吸附剂有助于将 分析物从水溶液中萃取入有机溶剂内。含分析物的水溶液在穿过萃 取柱时，水相将吸附到硅藻土上。待溶液吸附到吸附剂上之后，使 用不可混溶的有机溶剂进行萃取，分析物从萃取柱上被洗脱 [7]。 由于水溶液在吸附剂中形成的分散层非常薄，两种溶剂会紧密接 触，因此不必振荡即可将分析物萃取入有机溶剂中，而在 LLE 萃 取过程中必须进行振荡。这样有助于避免出现 LLE 中常见的乳化 现象。SLE 萃取柱的外层通常与有相分离滤芯结合以防止发生混 合，如果发生混合，将会导致水相与有机溶剂一起被洗脱下来。 Chem Elut SLE 具有多种可选规格，可购买预填充的萃取柱，也 可散装购买。

实验部分 所有有机溶剂均为 HPLC 级纯度。乙腈购自 Burdick and Jackson (Muskegan, MI)。甲醇购自 Fisher Scientific (Fairlawn, NJ)。丙 酮和乙酸乙酯购自 Pharmco (Brookfield, CT)。超纯水由 Millipore Synergy UV 纯化系统制得。邻苯二甲酸二乙酯、邻苯二甲酸二丙 酯、邻苯二甲酸丁苄酯和邻苯二甲酸二环己酯购自 Sigma-Aldrich Corp。采用甲醇配制成含四种邻苯二甲酸酯的储备液。储备液中 各种邻苯二甲酸酯的浓度为大约 10 mg/mL。采用甲醇对储备液 进行稀释，得到用于创建校准曲线的标准溶液。配制得到的标准 溶液的标示浓度分别为 10、25、50、100、500 和 1000 µg/mL。 萃取过程 向沐浴露中加入邻苯二甲酸酯储备液，然后用 SLE 和 LLE 进行处 理，测定每种邻苯二甲酸酯的百分比回收率。SLE、LLE 和 HPLC 方法采用已出版的用于测定蜂蜜中农药残留物 [8,9] 和测定沐浴露 中对羟基苯甲酸酯 [10] 的方法。采用 SLE 或 LLE 进行萃取之前， 首先按照图 1 所述的步骤制备样品。然后将制得的样品全部倒入 SLE 萃取柱中（对于 SLE）或分液漏斗中（对于 LLE）。按照图 1 所 述的步骤制得 24 个独立样品。将这些样品分为两组，每组 12 个。 其中 12 个样品加入 200 µg/mL 的邻苯二甲酸酯，另外 12 个样品 加入 20 µg/mL 的邻苯二甲酸酯，计算高浓度和低浓度邻苯二甲 酸酯的回收率。按照图 2 所述的步骤使用 SLE 方法萃取 6 个高浓 度加标样品和 6 个低浓度加标样品。其余的 12 个样品按照图 3 所 述的步骤采用 LLE 方法进行萃取。这样即可对两种方法进行直接 比较。采用的 SLE 萃取柱为 Chem Elut，5 mL 无缓冲柱。

结论 本应用简报显示了利用 Agilent Chem Elut SLE 萃取柱从洗发水/ 沐浴露基质中萃取邻苯二甲酸酯的有效方法。使用 SLE 方法时， 与邻苯二甲酸酯一起从基质中萃取出的干扰物最少。相比之下， 使用 LLE 方法萃取得到的干扰物会影响分析物的准确定量分析。采 用 SLE 所得萃取液的色谱图比采用 LLE 所得的色谱图更加清晰， 使用 SLE 得到的结果整体优于 LLE 得到的结果。